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液氮罐短期儲存胚胎的可行性研究的討論
小鼠胚胎冷凍保存的成功，極大地推動了低溫生物學的發(fā)展。胚胎冷凍保存現(xiàn)已成為實驗動物保種的重要手段之一。實驗動物胚胎庫較活體保種有著經(jīng)濟又安全的優(yōu)勢。而通過胚胎引種因為快捷而廉價，使得國內(nèi)外的胚胎運輸也變得日益廣泛。
氣相液氮運輸罐不同于傳統(tǒng)的也相液氮罐，凍存的胚胎不直接接觸液氮。它的罐壁內(nèi)層有一層液氮層，液氮層吸附大量液氮，并向外排出液氮蒸汽來使罐內(nèi)溫度達到一188℃至一194℃。胚胎不接觸液氮，能降低胚胎之間的交叉感染。同時操作時不會被液氮凍傷，增加了安全性。
本次實驗中采用C57BL／6、B6D2、DBA／2、B10A4個小鼠品系，是因為其中既有近交系、同類系，也有雜交F1代。4個品系的冷凍胚胎在氣象液氮運輸罐存放14天的復蘇率與保存在氣相液氮罐的胚胎復蘇率均無差異；C57BL／6、B6D2、DB舭這3個品系的出生率也無差異。結(jié)果中B10A小鼠的出生率的差異顯著可能時因為本次實驗的時間跨度較大。
從3月份一直持續(xù)到5月份，3月份放置氣相液氮運輸罐的室溫為ll℃，5月份為18℃。環(huán)境溫度可能會使氣相液氮罐內(nèi)的液氮蒸汽消耗過快，罐體內(nèi)溫度便會上升，而且環(huán)境溫度還會在胚胎的轉(zhuǎn)移過程中產(chǎn)生影響。
所以在盡量使放置氣相液氮運輸罐的環(huán)境保持比較低的溫度，本實驗胚胎在氣相液氮罐存放時間zui長為14 d，因為本次實驗考慮到國際運輸所需時間較長，所以胚胎每次存放時間都使用了氣相液氮運輸罐保存時間的上限。另外胚胎每次存放的數(shù)量較少，因此胚胎都在罐體的底部，是整個罐體溫度zui低的地方。
考慮到實際運用中的運輸時間會有長短以及運輸胚胎時數(shù)量較多時，一根冷凍管夾可能會放上4個冷凍管，所以胚胎就不一定都位于罐體的底部。有關胚胎在氣相液氮運輸罐不同保存時間以及不同存放高度的保存結(jié)果，有待進一步研究。
